Alkalická fosfatáza

Alkalická fosfatáza (ALP, AP, EC 3.1.3.1) je enzym, který patří mezi hydrolázy. Odstraňuje fosfátovou skupinu na 5- a 3- pozici u mnoha typů molekul včetně nukleotidů, proteinů a alkaloidů. Proces odstranění fosfátové skupiny se nazývá defosforylace.

Alkalická fosfatáza

Někdy je GPI-vázaná na membránu.^[1]

Vlastnosti

• Alkalická fosfatáza je nejúčinnější v alkalickém prostředí
• Alkalickou fosfatázu inhibuje (omezuje její působení) levamizol (anglicky: levamisole).^[2]
• Tento enzym nesnáší vysokou teplotu a proto se dá likvidovat varem

Alkalická fosfatáza u člověka

Alkalická fosfatáza se vyskytuje u člověka ve všech tkáních celého těla, ale je koncentrována zejména v játrech, žlučovodu, ledvině, kostech a v placentě.

Normální hodnoty alkalické fosfatázy v krvi člověka:)^[3]

• muži: 70-175 U/l (jednotek enzymové aktivity na litr)
• ženy: 55-170 U/l

v krevní plazmě: 30-150 U/l

Využití

Alkalická fosfatáza má široké využití v molekulární biologii, protože DNA má fosfátovou skupinu umístěnou právě na 5´ uhlíku deoxyribózy. Odstranění fosfátové skupiny zabrání navázání 5' konce k 3' konci druhé molekuly.

Alkalická fosfatáza má také využití v imunochemii (imunohistochemii).

V molekulární biologii se pro alkalickou fosfatázu používají následující substráty:

• pNPP = 4-nitrofenylfosfát
• Fast Red, TR salt / NABP = 4-chloro-2-methylbenzen diazonium chlorid / naftol-AS-BI fosfát (anglicky: naphtol-AS-BI phosphate)
• Fast Red, TR salt / NAMP = naftol-AS-MX fosfát
• New Fuchsin / NABP
• obecný fosfát / NBT, např. BCIP / NBT