GAL4/UASシステム

GAL4/UASシステムとは、酵母に由来するGAL4タンパクとUASを利用した遺伝子発現システムである。遺伝子の発現を人工的に制御するシステムの一種。

概要

GAL4/UASシステムは、転写を活性化されるGAL4タンパクによってUASと呼ばれる配列下に導入した遺伝子を強制発現させるシステムである。

プロモーターを利用して特定の細胞種でのみGAL4を発現させ、全身にUAS-レポーター遺伝子を持つ個体と掛け合わせれば、特定の細胞種でのみレポーター遺伝子を発現できる。レポーター遺伝子の代わりに毒素の遺伝子を用いれば、特定の細胞種のみを殺すことができる。

開発

初登場はハエ (1993)である^[1]。のちにゼブラフィッシュでも開発された^[2][3]。

UASG

GAL4/UASシステムに用いられるUASは主に酵母のGal1・Gal10を制御するUAS (UAS_G)である。UAS_Gは複数のGAL4結合領域からなっている。GAL4/UASシステムはそのうち一部を利用している。

type	sequence	species	finder/developer	usecase
UASG
Ⅰ	CGGATTAGAAGCCGCCG	yeast	Giniger, et al., 1985.[4]
Ⅱ	CGGGTGACAGCCCTCCG	yeast	Giniger, et al., 1985.[4]
Ⅲ	AGGAAGACTCTCCTCCG	yeast	Giniger, et al., 1985.[4]
Ⅳ	CGCGCCGCACTGCTCCG	yeast	Giniger, et al., 1985.[4]
near-consensus synthetic 17 bp	CGGAAGACTCTCCTCCG	synthetic[5]	Giniger, et al., 1985.[4]
17M	CGGAGTACTGTCCTCCG	synthetic[6]	Webster, et al.. 1988.[7]	pT2RUASGCaMP7a (5x)[8], pUAST (5x, fly gene expression), pUASTattB (5x, fly gene expression), pMF3 (10x, GD RNAi library in Vienna Drosophila Resource Center)

その他のUAS_G: ^[9]

欠点

UASのサイレンシングが問題になる^[10]. 至適UASリピート数には議論がある^[11]。

参考文献

浅川和秀・川上浩一. 「Tol2トランスポゾンを用いたゼブラフィッシュGAL4エンハンサートラップ法の確立」^[12]