Прижизненное окрашивание

Прижизненное или витальное окрашивание — метод окрашивания организмов или живых препаратов их тканей для повышения контраста при наблюдении под микроскопом.

Иногда витальным окрашиванием называют также введение красителя в живой организм, с дальнейшим его умерщвлением и приготовлением микропрепарата^[1].

Причины прижизненного окрашивания

Микроскопирование живых тканей имеет существенный недостаток — внутриклеточные структуры при таком исследовании сложно отличить друг от друга, поскольку они имеют сходные коэффициенты преломления света. Один из приёмов для преодоления этого недостатка состоит в окрашивании клеток и тканей (другой приём — использование специальных оптических устройств)^[2].

Прижизненное окрашивание позволяет наблюдать одновременно как особенности строения, так и особенности функционирования организмов, клеток и тканей^[2].

Ряд методов витального окрашивания микроорганизмов разработан и применяется в микробиологии.

Витальные красители

Красители, пригодные для прижизненного окрашивания, называются витальными. В отличие от многих других красителей, используемых в микроскопировании, они обладают двумя дополнительными свойствами: имеют низкую токсичность и обладают способностью легко проникать в живые клетки и их структуры через клеточные оболочки и цитоплазматические мембраны^[2].

По оптическим свойствам различают витальные красители для видимого света и флуоресцентные красители (называемые также флуорохромами)^[2].

По химическим свойствам различают основные, кислотные (кислые) и электронейтральные витальные красители^[2].

Основные красители

• Акридиновый оранжевый
• Метиленовый синий — используется для витального окрашивания простейших, изолированных клеток, культур тканей, тонких плёнок живых тканей. Используется раствор 1:1000 — 1:10 000. В ботанике используется для окраски вакуолей, накапливаясь в клетках, содержащих дубильные вещества. Может использоваться для окраски митохондрий^[2].

Кислотные (кислые) красители

• Индигокармин
• Кислый фуксин
• Калий-флуоресцин
• Эозин

Нейтральные красители

• Родамин B

См. также

• Зелёный флуоресцентный белок
• Флуоресценция в биологических исследованиях