Тіогліколеве середовище

Тіогліколеве середовище - це середовище, яке використовують для контролю стерильності різних біоматеріалів, а також для культивування широкого кола аеробних, мікроаерофільних і анаеробних бактерій.

Склад

Гідролізат казеїну - 15,00 грам/літр

Дріжджовий екстракт - 5,00 грам/літр

Глюкоза - 5,50 грам/літр

Натрію хлорид - 2,50 грам/літр

L-цистин - 0,50 грам/літр

Натрію тіогліколят - 0,50 грам/літр

Резазурін - 0,001 грам/літр

Агар-агар - 0,75 грам/літр

Кінцеве значення рН (при 25°З) 7,1 ± 0,2

Приготування

Розмішати 29,75 г порошку М009 або в 1000 мл дистильованої води. Прокип'ятити для повного розчинення частинок. Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 атм (121°С) протягом 15 хв. Охолодити до 25°С і залишити для зберігання в темному прохолодному місці (при температурі нижче за 25°С).

Примітка : якщо більш, ніж третина середовища зверху стала рожевого кольору, її можна один раз відновити, прогрівши у киплячій водяній бані або струмені пари до зникнення рожевого забарвлення.

Принцип і оцінка результату

Це середовище запропонував Бревер ^[1] для швидкого культивування аеробів, а також анаеробів (в зв'язку з додаванням редукуючої речовини і невеликої кількості агар-агару). Американські фахівці ^[2][3] рекомендували вказані середовища для тестів на стерильність антибіотиків, біоматеріалів, харчових продуктів, а також для визначення фенолового коефіцієнту і спороцидних властивостей дезінфектантів. Разом з тим, середовища призначені для дослідження прозорих рідин і водорозчинних матеріалів. Глюкоза, гідролізат казеїну, дріжджовий екстракт, м'ясний екстракт і L-цистин дають поживні речовини для розмноження бактерій. Тіогліколят натрію знижує окислювально-відновлювальний потенціал, а також нейтралізує бактеріостатичний ефект з'єднань ртуті і інших важких металів, що знаходяться в досліджуваному матеріалі. Будь-яке підвищення концентрації кисню супроводиться зміною кольору спеціального індикатора редокс-потенціалу резазуріна на червоний ^[4][5][6]. Низький редокс-потенціал допомагає підтримувати невелика кількість агару в середовищі^[7].

Контроль якості

Зовнішній вигляд порошку

Гомогенний сипучий жовтий порошок.

Колір і прозорість готового середовища

Готове середовище має світло-солом'яне забарвлення, прозоре або злегка опалесціює; не більше за 10% в його верхній частині може забарвлюватися в рожевий колір при зберіганні.

Кислотність середовища

При 25°С водний розчин М009 (2,97% вага/об‘єм) має рН 7,1 ± 0,2.

Культуральні властивості

Ростові характеристики референс-штамів через 48-72 год при 35°С.

Штам мікроорганізмів (АТСС) Ріст

• Bacillus subtilis (6633) - Рясний

• Candida albicans (10231) - Рясний

• Clostridium sporogenes (11437) - Рясний

• Micrococcus luteus (9341) - Рясний

Neisseria meningitidis (13090) - Рясний

Streptococcus pyogenes (19615) - Рясний

• Bacteroides vulgatus (8482) - Середній або хороший

Примітка: * культуру можна інкубувати при 25-30°С протягом 2-7 днів.

Умови і терміни зберігання

Порошок зберігати при температурі нижче за 25°С. Вжити до дати, вказаної на етикетці. Готове середовище зберігати при кімнатній температурі в темряві.