全内反射荧光显微镜

全内反射荧光显微镜（total internal reflection fluorescent microscope，TIRFM），利用光线全反射后在介质另一面产生衰逝波的特性，激发荧光分子以观察荧光标定样品的极薄区域，观测的动态范围通常在200nm以下。因为激发光呈指数衰减的特性，只有极靠近全反射面的样本区域会产生荧光反射，大大降低了背景光噪声干扰观测标的，故此项技术广泛应用于细胞表面物质的动态观察以及动态单分子荧光成像。

(Cis-)全内反射荧光显微镜 (TIRFM) 图

1. 样品
2. 损耗波范围
3. 盖玻片
4. 浸油
5. 物镜
6. 发射光束（信号）
7. 激发光束

全反射荧光显微镜的激发方式分为物镜式（Cis）和棱镜式(Trans)。在物镜式显微镜中，激发光束直接穿过物镜并在盖玻片/样品交界处发生全反射。而在棱镜式显微镜中，激发光束通过棱镜折射在棱镜/样品交界处发生全反射。虽然物镜式显微镜因为激发光束与发射光束光路接近的原因通常有更低的信噪比，但相比与棱镜式激发范围更可控（仅限于视场）。因此物镜式的应用更加广泛。

(Trans-)全内反射荧光显微镜 (TIRFM) 图

1. 物镜
2. 发射光束（信号）
3. 浸油
4. 盖玻片
5. 样品
6. 损耗波范围
7. 激发光束
8. 棱镜