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引物

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引物
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引子[1][2](英语:primer)又称引子,是一小段单链核酸(亦可称为寡核苷酸),含游离3′-羟基,并可引发聚合反应。引子可为DNARNA,参与DNA复制的起始步骤。DNA复制过程中,由于DNA聚合酶只能将核苷酸接在现有核酸3'端上,所以必须有一段引子先接合到模板股上,DNA聚合酶才能开始合成互补股[3]

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DNA复制叉图示;RNA引物位于图上方

自然界生物细胞中的DNA复制过程,只会使用RNA引子(RNA primer);而人工合成,用来参与生物体外的DNA合成过程(包括聚合酶连锁反应DNA定序)之引子,则因为对稳定度的需求,多为DNA引子(DNA primer)。人工合成单链核酸的技术另可应用于制造探针

设计引子时,有一些必须注意的标准,其中包括引子本身的解链温度(melting temperature, Tm)。解链温度可由引子长度及其中的碱基组成决定。引子越长,解链温度便会较高;而若鸟嘌呤胞嘧啶的占比较高,亦会因为与模板股之间的氢键数较多,导致更高的解链温度。通常利用一个称为“BLAST”的工具协助引子设计,此工具可指出一段DNA中具有特异性的区域,根据这段序列来设计引子,可降低引子接合到错误位置的可能性。[4]

使用RNA作为引子的合成过程中,在DNA聚合酶将整段DNA复制完成后,RNA引子会被移除,并在空缺位置补上DNA。

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参见

参考资料

外部链接

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