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G418
化合物 来自维基百科,自由的百科全书
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G418,即遺傳黴素(Geneticin),是一種氨基糖苷類抗生素,結構與慶大黴素B1相似。G418最初是於細菌小單孢菌中發現[1]。G418是新黴素的類似物,其作用機理也與新黴素相似。即,G418可以通過阻斷多肽合成(蛋白轉譯)殺死原核細胞或真核細胞[1]。新黴素抗性基因neo可以編碼一種能使G418失效的酶氨基糖苷3'磷酸轉移酶,進而使細胞獲得對G418的抗性[1]。在實驗室中,利用上述機制,可以使用G418篩選基因工程改造後的細胞[2]。
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作用機理及抗性機理
G418是一種特殊的抗生素。G418既可以殺死真核細胞,也可以殺死原核細胞。G418的作用機理是通過與80S核糖體(真核細胞)或70S核糖體(原核細胞)結合,進而阻止蛋白轉譯過程中的延長過程,使合成中的多肽鏈合成中止。最終,細胞會因爲缺乏必要的蛋白而死亡[3][4]。基於G418的作用機理,對蛋白質需求較高的細胞,如分裂中的細胞,會比對蛋白質需求相對較少的細胞更快被G418殺死[5]。新黴素抗性基因neo可以使細胞在含有G418的培養基中存活。neo基因抵抗G418的機理在於,neo基因能編碼一種氨基糖苷3'磷酸轉移酶。該酶可使G418磷酸化,減小其與核糖體的親和力,達到讓G418失效的作用[6]。
細胞生物學中的應用
導入neo基因等G418抗性基因的真核細胞可以於含有G418的培養基中存活,而無這類基因的細胞則會在這種培養環境中死亡。研究人員可以利用這一點,於載體上加入neo基因。這樣,當把載體導入細胞時,neo基因也會一併導入。之後,在培養基中加入G418即可殺死未能成功導入載體的細胞,而留下成功導入載體的細胞,利於後續研究的進行[1][7]。
參見
參考
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