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噬菌體展示技術

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噬菌体展示技术
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噬菌體展示技術(英語:Phage display),將編碼所需產物的外源 DNA 片段插入噬菌體基因組,並使之與噬菌體衣殼蛋白編碼基因或其他結構基因相融合,然後用該重組噬菌體侵染宿主細菌複製形成大量帶有雜合衣殼蛋白(或其他結構蛋白)的噬菌體顆粒,從而捕獲 cDNA 表達文庫中與「誘餌」相互作用的蛋白質[1]

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噬菌體展示週期。 1) 病毒外殼蛋白+要被進化的基因(通常是抗體片段)的融合蛋白在噬菌體中表達。 2) the library of phage are washed over an immobilised target. 3) the remaining high-affinity binders are used to infect bacteria. 4) the genes encoding the high-affinity binders are isolated. 5) those genes may have random mutations introduced and used to perform another round of evolution. The selection and amplification steps can be performed multiple times at greater stringency to isolate higher-affinity binders.

噬菌體展示技術在病毒研究領域有廣泛運用[2]

噬菌體展示技術中最常用的噬菌體是M13和 fd 絲狀噬菌體[3][4], 儘管T4[5]、T7和λ噬菌體也被使用。

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歷史

1985年,喬治·P·史密斯(George P. Smith)首次描述了噬菌體展示技術,當時他通過將病毒的衣殼蛋白與一系列肽序列中的一個融合,證明了肽在絲狀噬菌體(感染細菌的細長病毒)上的展示[6]

參看

競爭技術:

參考資料

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