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末端脫氧核苷酸轉移酶
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末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl transferase、TdT、末端轉移酶),是一種特殊的DNA聚合酶,顯示出未成熟的、"前B","前T淋巴細胞"和"急性淋巴性白血病/淋巴瘤細胞"。"末端轉移酶"於"抗體基因重組時"加上N核苷酸(N-nucleotide)至V(D)J的外显子上,能夠形成連接多樣性(Junctional diversity)的現象。在人類中,末端轉移酶是由DNTT基因來編碼。 [1][2]
功能
"末端轉移酶"催化添加核苷酸至DNA分子的3'末端的反应。不像大多數的DNA聚合酶,它不需要一個模板。這種酶的優選底物是3'突出端,但它也可以添加"核苷酸"(nucleotides)至"鈍末端"(blunt end)或"凹陷的3'末端"(recessed 3' end)。钴是一種必要的辅因子,但是在"體外"反应条件下(in vitro)鎂(Mg)及錳(Mn)也可以起相同的作用。
使用
末端轉移酶在分子生物學中的應用。它可以被用來在快速擴增cDNA末端(RACE)中來添加"核苷酸"(nucleotide),然後可以用來作為在後續PCR的"引物"(primer)的模板。它也可以用於添加標記放射性同位素的核苷酸,例如在TUNEL检测(末端脫氧核苷酸轉移酶"dUTP缺口末端標記"(dUTP Nick End Labeling)),用於细胞凋亡的示範(其中的標記,在某種程度上,通過片段化DNA來進行)。也可用於治療"急性淋巴性白血病"診斷之"免疫熒光測定"(immuno-fluorescence)。[4]
在免疫組織化學中,抗體TdT酶可用於顯示未成熟的T細胞和B細胞以及多能的"造血(Haematopoiesis)幹細胞"的存在,其具有抗原,而成熟的淋巴樣細胞總是呈"TdT陰性"。而末端轉移酶陽性的細胞中發現少量的健康淋巴結和扁桃體,急性淋巴細胞白血病的惡性細胞也呈"TdT陽性",而抗體,因此可以被用來作為面板診斷及區別這種疾病的一部分,比如,"初發期的小細胞腫瘤"(small cell tumours of childhood)。[5]
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參見
註釋
延伸阅读
外部連結
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