SacI

SacI ist ein Restriktionsenzym aus dem Bakterium Streptomyces achromogenes.

Endonuklease SacI
Masse/Länge Primärstruktur	358 Aminosäuren, 39.965 Da
Bezeichner
Gen-Name(n)	SacI (Rebase)
Externe IDs	UniProt O31074
Enzymklassifikation
EC, Kategorie	3.1.21.4, Restriktionsenzym
Reaktionsart	Hydrolyse
Substrat	DNA
Produkte	Zweisträngige DNA-Fragmente mit terminalen 5'-Phosphatgruppen
Vorkommen
Übergeordnetes Taxon	Streptomyces achromogenes

Eigenschaften

SacI ist eine Endonuklease (Typ II, Subtyp P), die DNA an einer palindromischen DNA-Erkennungsequenz schneidet. Durch den versetzten Schnitt der DNA durch SacI entsteht ein sticky end mit einem 4-Basen-Überhang und je einer Phosphatgruppe an beiden 5'-Enden der doppelsträngigen DNA-Produkte. SacI wird weder durch eine DAM-Methylierung, noch durch eine DCM- oder eine CpG-Methylierung gehemmt. Nach einer Restriktion von DNA in vitro kann SacI durch 20-minütiges Erhitzen auf 65 °C denaturiert und somit inaktiviert werden. Meistens wird SacI als rekombinantes Protein in E.coli hergestellt.

Erkennungssequenz	Restriktionsschnitt
5'-GAGCTC-3' 3'-CTCGAG-5'	5'-GAGCT C-3' 3'-C TCGAG-5'

Anwendungen

SacI wird für Restriktionsverdaue im Rahmen von Klonierungen oder Restriktionsanalysen^[1] verwendet.