Kastle-Meyer-Test

Das Kastle-Meyer-Reagenz

Zusammensetzung

Die Stammlösung^[1] besteht aus

20 g Kaliumhydroxid
2 g Phenolphthalein und
30 g Zink-Pulver,

die in 100 ml Wasser suspendiert werden und 2 h unter Rückfluss gekocht (oder 48 h stehen gelassen) werden, bis die Lösung farblos ist. Sie wird üblicherweise in einer braunen Flasche mit Zink-Pulver aufbewahrt. Die Arbeitslösung zur Durchführung des Tests besteht aus 10 ml dieser Stammlösung in 40 ml Ethanol.

Vorgehensweise

Zum Nachweis wird die Spur ("Probe") mit zwei Tropfen vom Kastle-Meyer-Reagenz und anschließend mit zwei Tropfen einer 3%igen Wasserstoffperoxidlösung versetzt. Eine Rotfärbung binnen Sekunden zeigt eine positive Reaktion an.

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Geschichtliches

Der Grundstein für den Kastle-Meyer Test wurde durch Louis Jacques Thénard und Christian Friedrich Schönbein gelegt. Thenard entdeckte 1818, dass Wasserstoffperoxid (H₂O₂) durch Blut zersetzt wird. Schönbein entwickelte aus dieser Entdeckung 1863 den ersten Test auf Blut. Dabei wird die Zersetzung von Wasserstoffperoxid durch das im Blut (in den Erythrozyten) enthaltene Häm-haltige Protein Hämoglobin beobachtet. Das Ergebnis dieser Reaktion ist ein Aufschäumen, wobei Sauerstoff-Blasen aufsteigen. Schönbein folgerte daraus, dass ein unbekannter Fleck, der durch H₂O₂ aufgeschäumt wird, wahrscheinlich Hämoglobin enthält und somit Blut ist.

Anfang 1900 (1901) entwickelte der Chemiker Joseph Hoeing Kastle (1864–1916) einen Vortest für Hämoglobin, der Phenolphthalein als Farb-Indikator enthielt.^[2] Einige Jahre später (1903) verfeinerte und verbesserte der Internist und Chemiker Erich Meyer (1874–1927) das Reagenz, weshalb es auch als Kastle-Meyer Test bezeichnet wird.^[3]

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Stärken und Nachweisgrenzen

Zusammenfassung

Kontext

Wenn man über Vortest-Reagenzien spricht, sollte man sich mit zwei Begriffen vertraut machen: der Sensitivität und der Spezifität.

Sensitivität

Die Sensitivität bezieht sich auf den Verdünnungsfaktor einer Substanz, die der Test noch nachweisen kann. Die Sensitivität des KM-Tests liegt bei ungefähr 1:10.000: Ein Tropfen Blut kann also nach Verdünnung mit 10.000 Tropfen Wasser noch nachgewiesen werden.

Spezifität

Die Spezifität bezieht sich auf die Reaktionsfähigkeit des Tests auf Substanzen, die vom Blut verschieden sind. Bisher konnte man soweit eine wahr-positive Reaktion nur in Anwesenheit von Hämoglobin nachweisen. Falsch-positive Reaktionen können in Präsenz von chemischen Oxidantien entstehen, auch Gemüse-Peroxidasen können mit dem Test reagieren. Aber diese Reaktionen könnten nur dann auftreten, nachdem Phenolphthalein aufgetragen wurde, noch vor Zugabe von Wasserstoffperoxid. Eine wahr-positive Aussage kann nur entstehen, nachdem Wasserstoffperoxid dazugegeben wird. Der KM-Test reagiert also spezifisch auf Blut.

Alternativen

Zuverlässiger^[1] ist ein neueres Verfahren, bei dem Luminol auf eine Verdachtsfläche gesprüht wird: Wenn die Spur zu leuchten beginnt, bestätigt sich der Blutverdacht.