Переключение классов антител

Переключе́ние кла́ссов антите́л, или переключе́ние кла́ссов иммуноглобули́нов, или переключе́ние изоти́пов (англ. immunoglobulin class switching), — процесс переключения B-лимфоцита (B-клетки) с синтеза антител одного класса на синтез антител другого класса, например, с иммуноглобулинов M (IgM) на иммуноглобулины G (IgG). В ходе переключения классов константная часть локуса IGH, кодирующего тяжёлую цепь антител, претерпевает изменения, в то время как вариабельный участок остаётся неизменным. Так как вариабельный участок антитела не меняется, его антигенная специфичность остаётся прежней, и антитело продолжает распознавать тот же эпитоп.

Механизм переключения классов антител

Механизм

В кластере генов IGH присутствует несколько генов константных доменов антител, которые экспрессируются в определённой последовательности в комбинации с одним и тем же геном, кодирующим вариабельный домен. У человека гены в кластере IGH располагаются в последовательности: Cμ, Cδ, Cγ3, Cγ1, Cα1, Cγ2, Cγ4, Cε, Cα2, а у мыши — Сμ, Сδ, Сγ3, Сγ1, Сγ2b, Cγ2a, Cε, Cα. Между Cγ1 и Сα1 у человека располагается псевдоген, гомологичный Cε мыши^[1].

Переключение классов происходит в зрелой B-клетке после её активации при участии мембраносвязанной молекулы антитела или B-клеточного рецептора. В результате B-клетка начинает производить антитела другого класса, то есть с другой константной частью тяжёлой цепи, но с тем же вариабельным доменом, который был сформирован за счёт V(D)J-рекомбинации в незрелой B-клетке^[2].

Наивные B-клетки^[англ.] производят антитела классов IgM и IgD, которым соответствуют два первых сегмента тяжёлых цепей в иммуноглобулиновом^[англ.] локусе. После активации антигеном B-клетки приступают к пролиферации. Если их поверхностные молекулы CD40 и CD154^[3] или рецепторы цитокинов^[англ.] свяжутся с определёнными сигнальными молекулами (при участии T-хелперов), то в B-клетках происходит переключение классов антител, и они начинают вырабатывать антитела классов IgG, IgA или IgE. Благодаря переключению классов дочерние клетки, происходящие от одной B-клетки, секретируют антитела разных изотипов^[англ.] или подтипов (например, IgG1, IgG2 и другие)^[4].

Процесс, ответственный за переключение классов антител, называется рекомбинационным переключением классов (англ. class switch recombination, CSR). В ходе CSR некоторые гены локуса тяжёлой цепи антитела удаляются, и образовавшиеся на месте разрывов концы соединяются, в результате чего образуется функциональный участок, кодирующий антитело другого изотипа. Двуцепочечные разрывы^[англ.], образующиеся при CSR, происходят в районе консервативных нуклеотидных мотивов, называемых участками переключения (S-участками). S-участки имеют последовательности GAGCT или GGGGGT. Переключению предшествует их полимеризация (до 150 повторов). В начале процесса переключения происходит сближение полимерных S-участков и формируется петля, в которую попадают С-гены, расположенные между V-геном и C-геном, который в дальнейшем будет экспрессироваться. По краям петли вносятся два двуцепочечных разрыва по двум S-участкам при участии разнообразных ферментов, среди которых: индуцируемые активацией цитидиндезаминазы^[англ.] (англ. activation-induced (cytidine) deaminase, AID), урацил-ДНК-гликозилаза^[англ.], апиримидиновые/апуриновые (AP) эндонуклеазы^{[англ.][5][6]}; они получают доступ к ДНК благодаря предшествующему ремоделированию хроматина. Фрагмент ДНК между двумя S-участками удаляется из хромосомы, в результате чего гены константных доменов тяжёлых цепей μ и δ вырезаются и замещаются соответствующими генами тяжёлых цепей γ-, ε- или α-типа. Сшивание свободных концов ДНК происходит в ходе негомологичного соединения концов, благодаря чему ген вариабельного домена соединяется с геном нужного типа константного домена тяжёлой цепи^[7]. Концы ДНК могут быть соединены и без негомологичного соединения концов — путём микрогомологичного соединения концов^[8]. За исключением IgD и IgM, в определённый момент времени B-клетка образует антитела только одного класса. Хотя переключение классов в большинстве случаев является результатом перестройки одной хромосомы, в 10—20 % случаев (в зависимости от классов антител) происходят межхромосомные транслокации между гомологичными хромосомами, при которых перемешиваются участки генов тяжёлых цепей с разных аллелей^[9][10][3].

Ремоделирование хроматина, доступность S-участков для аппарата транскрипции и AID^[англ.], а также сшивание ДНК после внесения разрывов в S-участки находятся под контролем суперэнхансера, известного как 3'-регуляторный участок (3'-RR)^[11]. В некоторых случаях 3'-RR может сам становиться мишенью AID, и в него вносятся двуцепочечные разрывы, что в итоге приводит к делеции локуса тяжёлой цепи. Этот процесс известен как суицидная рекомбинация локуса^[англ.] (англ. locus suicide recombination, LSR)^[12].

Как правило, переключение — необратимый процесс, так как ненужные гены C-доменов удаляются в процессе переключения, однако из этого правила известны единичные исключения^[3].

Регуляция

Важнейшую роль в регуляции переключения классов антител играют цитокины, которые секретируют T-хелперы^[13] и регуляторные T-клетки. В таблицах ниже представлены сведения о том, как различные цитокины влияют на переключение синтеза определённых классов антител у человека и у мыши, а также указаны T-клетки, которые выделяют эти цитокины^[14][15].

Таблица 1. Переключение классов у мыши

T-клетки	Цитокины	Классы антител
		IgG1	IgG2a	IgG2b	IgG3	IgG4	IgE
Th2	IL-4	↑	↓	↓	↓	↓	↑
	IL-5					↑
Th1	IFNγ	↓	↑	↓	↑	↓	↓
Treg	TGFβ			↑	↓	↑
	IL-10[16]				↑

Таблица 2. Переключение классов у человека

T-клетки	Цитокины	Классы антител
		IgG1	IgG2	IgG3	IgG4	IgA	IgE
Th2	IL-4	↑		↓	↑		↑
	IL-5					↑
Th1	IFNγ	↓		↑			↓
Treg	TGFβ			↓		↑
	IL-10[17][18]	↑		↑